کلون کردن اپیتوپ های خطی آنتی ژن eg95 اکینوکوکوس گرانولوزوس در وکتور pegfp وبررسی بیان آن در سلول cho

زمینه و هدف: کیست هیداتیک، بیماریی است که ازطریق تخم انگل اکینوکوکوس گرانولوزوس دفع شده از مدفوع سگ آلوده به انسان و دام منتقل می شود. این انگل، یکی از کرم های نواری خانواده ی taeniidae می باشد که باعث ایجاد مشکلات بهداشتی گسترده در انسان و خسارت های اقتصادی به صنعت دامپروری می شود. بدین منظور، طراحی واکسن به منظور پیشگیری ازبروز این بیماری حائز اهمیت می باشد. مواد و روش ها: در این تحقیق، توالی های کدکننده ی اپیتوپ خطی تحریک کننده ی سلول های t، سنتز و در محل برش xhoi در وکتور pegfp-n1 کلون شد. وکتورهای نوترکیب توسط شوک الکتریکی به سلول های cho ترانسفورم شدند و بیان پروتئین مورد نظر به صورت فیوژن با پروتئین سبز فلورسنت توسط میکروسکوپ فلورسنت مورد بررسی قرارگرفت. یافته ها: صحت کلونینگ باروش pcrمستقیم بر روی کلونی و درنهایت با روش توالی یابی تایید گردید. بیان پپتید فیوژن با gfp توسط میکروسکوپ فلورسنت مورد بررسی قرارگرفت. نتیجه گیری: نتایج این تحقیق نشان می دهد که اپیتوپ های خطی آنتی ژن eg95کلون شده در وکتور pegfp و در سلول cho بیان-گردیده است. در ادامه می بایست این سازه dna به حیوان مدل (موش) تزریق شده و پاسخ ایمنی حیوان مورد بررسی قرارگیرد.